Amaç: Bu çalışmada, süperkritik CO 2 (ScCO 2) ekstraksiyon ve farklı çözücüler kullanılarak soxhlet ekstraksiyon yöntemlerinden elde edilen S ideritis brevidens 'in toprak üstü ekstrelerini incelemeyi, fitokimyasal bileşimlerini karakterize etmeyi ve çoklu ilaç dirençli bakterilere karşı antimikrobiyal ve antibiyofim aktivitelerini değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Yöntem: Farklı yöntemler ile elde edilen ekstrelerin fitokimyasal içeriği LC -MS/MS tekniği kullanılarak analiz edilmiştir. Ekstrelerin karbapenem dirençli Acinetobacter baumannii , Escherichia coli ve Klebsiella pneumoniae ile metisillin dirençli Staphylococcus aureus suşlarına karşı antibakteriyel etkinlikleri mikrodilüs yon yöntemi araştırılmıştır. Ayrıca, ekstrelerin Acinetobacter baumannii suşuna karşı antibiyofilm aktiviteleri kristal viyole yöntemi ile değerlendirilmiştir. Bulgular: Sideritis brevidens 'in farklı yöntemler ile elde edilen ekstrelerinden elde edilen önemli fenolik bileşiklerin çoğu, ScCO 2 ekstraksiyon yöntemi kullanılarak tespit edilmiştir. Gallik asit ve kuersetin sadece ScCO 2-100 ve ScCO 2-200'lü ekstrelerinde bulunmuştur. Buna karşın, klorojenik asit etanollü ve sulu ekstresinde yüksek miktarlarda bulu nmuştur. Test edilen suşlar arasında ScCO 2-200 ekstresinin 16 µg/mL konsantrasyonunda, özellikle Acinetobacter baumannii ve metisiline dirençli Staphylococcus aureus suşlarına karşı en düşük MİK değeri tespit edilmiştir. Disk difüzyon yöntemine göre, ScCO 2-100 ve ScCO 2-200'lü ekstresinde Acinetobacter baumannii suşuna karşı en geniş zon çapı (22 mm) görülmüştür. Ayrıca ScCO 2-100 ve ScCO 2-200'lü ekstresi Acinetobacter baumannii suşuna karşı konsantrasyona bağlı önemli antibiyofilm aktivite sergilemiştir. Sonuç: Bu bulgular, Sideritis brevidens 'in çoklu ilaç direnci gösteren bakteriyel enfeksiyonlara doğal bir antimikrobiyal ve antibiyofilm ajan kaynağı olarak önemli potansiyelini vurgulamaktadır. ScCO 2 ekstraksiyonu, biyoaktif fitokimyasalların seçici olarak elde edilmesinde önemli avantajlar sunmaktadır.