Bu almada, lkemizin bir sorunu olan fasiyoloza kar gelitirmeyi tasarladmz hzl serolojik tan testleri ve DNA as almalarna temel oluturmak zere F hepatica Cathepsin L1 protease geninin klonlanmas amalanmtr. Doal olarak infekte sr karacierinin safra yollarndan elde edilen yetikin F. hepatica'lar kullanld. TRI reagent kullanlarak toplam RNA elde edildi. Tersine Transkripsiyon ve PZR ilemi iin primerler (FhP1 ve FhP2) Genbank EMBL L33771'den yaralanlarak dizayn edildi. Tersine Transkripsiyon ile elde edilen cDNA (F. hepatica'nn Cathepsin L1 geni) PZR ile oaltld. cDNA, Wizard(r) Minicolunm (Wizard PCR Preps DNA Purification Systemi) kullanlarak saflatrld ve pTARGET Mammalian Expression Systemi kullanlarak vektre yerletirildi. Transformasyon iin, E. Coli JM109 hcreleri kullanld. Hcrelerin istediimiz rekombinant plazmidi ierip iermediini tespit etmek iin PZR-T ilemi yapld. Klonlama ilemi ayrca enzim kesim deneyi ile de doruland. Bu alma, daha zgl serolojik yntemlerde kullanlabilecek olan Cathepsin L1 proteinlerinin elde edilmesine bir basamak oluturacaktr. Ayrca pFhTCL1'in DNA as olarak gelecekte kullanlabilecek olmas ayr bir nem tamaktadr.
